Who are in the room? や Who is he in the room? とは言いません。
例えば、部屋に複数人いると知っていても、この場合は
ーWho is in the room?
「誰が部屋にいるの?」
と言います。
または次のようにも言えます。
ーIs there somebody in the room?
「部屋に誰かいるの?」
ご参考まで!
Who is in the room?
Who: 誰、という疑問詞です。
in the room: 「部屋の中に」という場所を示します。
例文:
"I heard a noise. Who is in the room?"
(「物音がしたよ。誰が部屋にいるの?」)
"The lights are on. Who is in the room?"
(「電気がついているね。誰が部屋にいるの?」)